茉莉酸对低温胁迫水稻幼苗的生理效应(2)

　　1.3.1 相对电导率的测定相对电导率的测定方法参照文献[5]，略有改动。将水稻新鲜叶片剪成小片置于已用去离子水冲洗过的小烧杯中，用去离子水冲洗6次，滤纸吸干表面水分，用电子天平精确称量0.3 g叶片，放置于已用去离子水洗过的大离心管中。加入去离子水5 mL，放入摇床（25 ℃，150 r/min）振荡4 h，取出后静置30 min，测得电导率X2（进行同样振荡及静置处理但未加水稻叶片的去离子水电导率为X1）。随后将样品置于-20 ℃冰箱中冷冻24 h以上，取出振荡5 h，静置30 min，测得电导率为X4（进行同样冷冻、振荡及静置处理但未加水稻叶片的去离子水电导率为X3），采用下列公式计算相对电导率：相对电导率=（X2-X1）/（X4-X3）×100%。

　　1.3.2 丙二醛（MDA）的测定丙二醛（MDA）测定采用TCA-TBA法，参考文献[6]，略有改动。

　　1.3.3 可溶性蛋白质含量的测定参照文献[5]采用考马斯亮蓝G-250染色法进行可溶性蛋白质含量的测定。

　　1.3.4 脯氨酸（Pro）含量的测定脯氨酸（Pro）含量的测定方法参照文献[5]。

　　1.3.5 过氧化物酶（POD）活性的测定 POD活性测定方法参照文献[7]，酶的活性以U/（mg·鲜重）表示。

　　1.3.6 超氧化物歧化酶（SOD）活性的测定参照文献[6]采用NBT光还原法测定SOD活性，以NBT光还原50%为一个酶活力单位，酶的活性以U/mg表示。

　　1.3.7 过氧化氢酶（CAT）活性的测定参照文献[8]采用Aebi的方法测定CAT活性，以每分钟催化分解1 mg分子底物的酶量为一个单位，酶的活性以mg/g·min表示。

　　1.4 数据分析

　　数据采用DPS 7.05数理统计软件进行Duncan新复极差显著性检验和Excel 2003软件作图。

　　2 结果与分析

　　2.1 低温处理条件下茉莉酸（JA）对水稻幼苗叶片相对电导率的影响

　　植物细胞膜对维持细胞微环境和正常的生理代谢起着重要的作用。在正常情况下，细胞膜对物质具有选择透性能力。当植物受到低温危害时，细胞膜遭到破坏，透性增大，使细胞内的电解质外泄，导致植物细胞浸提液的电导率增大。

　　由图1可见，对照组的日本晴与IR50的相对电导率相差无几，低温处理水稻幼苗2 d后，日本晴和IR50相对电导率分别为40.7%和45.3%，与对照组相比差异均达显著水平，用2.0 μmol/L的茉莉酸（JA）处理水稻幼苗2 d后，日本晴和IR50水稻幼苗的相对电导率分别比低温胁迫降低20.6%和10.2%，日本晴的降低幅度比IR50的降低幅度高，且与未加JA的低温处理相比差异均达显著水平，说明日本晴有很好的耐冷特性。

　　2.2 低温处理条件下茉莉酸（JA）对水稻幼苗叶片中MDA含量的影响

　　细胞膜脂质过氧化是评价细胞膜结构被破坏程度的常用指标[9]，其能与蛋白质的氨基或核酸反应生成shiff碱。MDA的积累可加剧细胞膜脂质过氧化的进程，对膜和细胞造成进一步的伤害，因此，常用MDA来表示细胞膜脂质过氧化的程度。

　　由图2可见，日本晴和IR50两品种经过4 ℃低温处理后，MDA的含量均显著增加，分别比对照增加151.9%和171.6%，经低温+JA处理2 d后，两品种MDA含量均明显降低，日本晴的MDA含量下降18.5%，与低温胁迫相比差异达显著水平。IR50的MDA含量下降9.3%。说明IR50的细胞膜脂质过氧化程度比日本晴高。

　　2.3 低温处理条件下茉莉酸（JA）对水稻幼苗叶片中可溶性蛋白质含量的影响

　　可溶性蛋白质是渗透性调节物质之一，植物通过诱导产生大量可溶性蛋白质以抵御低温等外界环境的胁迫。由图3可见，低温处理水稻幼苗2 d后，两品种的可溶性蛋白质含量均有明显增加，与处理前相比差异均达到显著水平，且IR50可溶性蛋白质增加值比日本晴高1.8 mg/g，低温+JA处理2 d后，日本晴可溶性蛋白质含量显著下降，IR50可溶性蛋白质含量下降1.1 mg/g。由此可知，茉莉酸处理能降低水稻叶片中可溶性蛋白质含量，减缓持续低温胁迫对水稻幼苗的危害。

　　2.4 低温处理条件下茉莉酸（JA）对水稻幼苗叶片中Pro含量的影响

　　Pro亲水性极强，能稳定原生质胶体及组织内的代谢过程，因而能降低冰点，提高植物的抗寒性。由图4可见，经过低温处理水稻幼苗2 d后，日本晴和IR50的Pro含量显著增加，分别比对照增加82.8%和100.1%。经过低温+JA处理后，日本晴和IR50的Pro含量均明显降低，分别比低温处理降低15.9%和8.2%，差异均达到显著水平。

　　2.5 低温处理条件下茉莉酸（JA）对水稻幼苗叶片POD活性的影响

　　由图5可见，经过低温处理后，日本晴的POD活性由30.1 U/mg上升至83.47 U/mg，IR50的POD活性由31.1 U/mg上升至90.93 U/mg。经过低温+JA处理后，日本晴和IR50的POD活性均明显降低，分别比低温处理时降低38.9%和23.9%。说明茉莉酸处理能降低低温胁迫对水稻幼苗叶片POD活性的影响。

　　2.6 低温处理条件下茉莉酸（JA）对水稻幼苗CAT活性的影响

　　由图6可见，经低温处理后，IR50的CAT活性快速上升，日本晴和IR50的CAT活性均显著上升，分别达到31.8、38.5 mg/（g·mim）。低温+JA处理后，日本晴与IR50的CAT活性均显著下降，分别下降33.8%、35.8%，日本晴CAT活性下降值低于IR50。

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